光漂白荧光恢复技术(fluorescence  recovery after photobleaching, FRAP)是用荧光物质标记细胞膜蛋白或膜脂质,借助于高强度脉冲激光来照射细胞某一区域,造成该区域荧光分子的光淬灭。如果膜蛋白是流动的,当停止激光照射后,漂白部位的荧光又可恢复,根据其恢复速度可以量化含有荧光标记探针的分子薄膜的二维横向扩散。这种方法使研究人员能够以亚秒级的精度监测单个细胞甚至单个气相色谱柱中的蛋白质运输。

技术平台

将器官芯片和多种嵌入式传感器整合,可以实现对药物作用长期自动化的监测与筛选。在FRAP检测中,我们将其与器官芯片串联,实现对细胞的实时监测,在不同器官芯片的检测中有高度灵活性及可操作性。

对于不同的细胞类型,我们依据丰富的项目经验从而提出不同的解决方案。例如,对于扩散较快的细胞,可通过改变扫描速度或减小要采集的整个帧的大小来提高图像采集率,或者增加漂白剂的感兴趣区域(ROI)的大小,也可以选择增加激光功率等等方法得到优化的图像及结果。在获得光漂白数据后,我们将会提供稳健的统计分析结果。

FRAP检测实验的示意图。  图1. FRAP检测实验的示意图。(Xiong, 2016)

参考文献:

  1. Xiong, R.; et al. Sizing nanomaterials in bio-fluids by cFRAP enables protein aggregation measurements and diagnosis of bio-barrier permeability. Nature communications. 2016, 7: 12982.

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